研究撷英丨血清胱抑素C作为乙酰胆碱受体抗体阳性全身型重症肌无力的潜在生物标志物

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研究撷英丨血清胱抑素C作为乙酰胆碱受体抗体阳性全身型重症肌无力的潜在生物标志物

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Frontiers in Immunology杂志在2025年5月在线发表了“Serum cystatin C as a potential biomarker for generalized acetylcholine receptor antibodypositive myasthenia gravis”一文，该文基于UK biobank大规模代谢筛查数据和中国重症肌无力（MG）患者队列，系统筛选并验证了与MG相关的新型外周潜在生物标志物，并进一步分析了其与临床及免疫学特征的关联。

研究背景

重症肌无力（myasthenia gravis, MG）是一种因神经肌肉接头传递功能障碍而引发的自身免疫性疾病，约80%的患者体内可检测到乙酰胆碱受体抗体（AChR-ab）。目前，致病性自身抗体是辅助MG诊断的重要依据，但其滴度与疾病严重程度并无直接相关性，难以用于病情分层和预后评估。近年来，MG生物标志物的研究持续推进，已发现包括微小RNA（如miR-146）、炎症因子（如IFN-γ、IL-21）、补体片段（如C5a）、血清代谢物（如花生四烯酸）等多种候选分子，GWAS和蛋白质组学分析也鉴定出特定HLA亚型（如HLA-B*08:01）和ITIH3等新的潜在标志物，但整体尚缺乏大样本的充分验证。基于此，本研究利用UKB 502400名成年人的代谢筛查数据及中国华山MG患者队列，旨在：（1）筛选与MG相关的新型外周生物标志物；（2）在独立MG队列中验证并评估其与临床及免疫学特征的相关性。

研究方法

本研究采用大样本筛选和多维度验证策略，主要路线及方法如下（图1）：

UKB数据库：MG潜在代谢标志物的筛选

本研究从UKB中筛选了285种代谢分子（包括30项血液生化指标、251项NMR代谢组学及4项尿液指标），通过患者自我报告和临床医生审核确定MG患者，仅纳入基线阶段数据。所有受试者（n = 502,409）按疾病编码分为三组：（1）MG组（n = 191）；（2）健康对照（HC，n = 118,493）；（3）其他疾病组（非MG，n = 383,716）。首先对MG组与健康对照组进行初步筛选，再与其他疾病组进一步比较，从而筛选出候选分子。

中国华山队列：代谢标志物的独立验证进一步机制探索

回顾性分析：

本研究回顾性分析了2024年华山医院神经内科120例全身型MG（gMG）患者和146名HC的实验室检测数据，包括：（1）肾功能相关指标，如血清Cys-C、eGFR、尿素氮（BUN）、尿酸（UA）；（2）外周血T淋巴细胞精确分型，包括Th1和Th2细胞绝对计数及其在Th细胞中的比例。

Th细胞亚群界定为：Th: CD3+CD4+，Th1: CXCR3-CCR6-，Th2: CXCR3-CCR6+。

前瞻性验证和机制探索：

2024年7月至12月，本研究前瞻性纳入了60例AChR-Ab+ gMG患者及60名HC。根据基线MG-ADL评分，患者被分为高负担组（MG-ADL≥6分）和低负担组（MG-ADL<6分）。血清Cys-C水平采用ELISA法测定，依据文献筛选的22种细胞因子、趋化因子及补体通过Luminex多因子检测进行分析。

研究结果

UKB发现：血清Cys-C浓度在MG患者中显著升高

在UKB队列中筛选出的前10种MG患者显著升高的代谢物如下所示（表1），MG患者的血清Cys-C水平显著高于健康对照组（p = 2.26E-41, adjusted p = 1.18E-40）和其他疾病患者（p = 2.88E-06，adjusted p = 1.02E-05），提示血清Cys-C在MG患者中具有独特的代谢标志物特征。（图2A）

中国MG队列验证：MG患者血清Cys-C浓度升高，与肾功能损伤无关

本研究前瞻性纳入了120例gMG患者和146例HC（表2），两组性别、年龄分布相当。中国gMG患者的血清Cys-C水平较HC组显著升高（p = 4.83E-08），与UKB结果相符（图2A）。

考虑到Cys-C与肾小球滤过功能相关，我们进一步分析了MG患者的肾功能指标，如eGFR、UA、BUN及肌酐等均无显著差异（图2A）。又考虑到免疫抑制治疗的潜在混杂影响，我们筛选出了35例未经受任何免疫治疗的中国gMG患者（naive gMG）（表3）。

分析后发现，naive gMG的血清Cys-C水平同样显著高于HC（p = 8.19E-03），而其他肾功能相关指标仍无显著差异，进一步证实MG患者血清Cys-C升高与肾功能损伤无关（图2B）。

实验验证：血清Cys-C水平与MG患者疾病严重程度相关

根据基线MG-ADL评分，患者被分为高负担组（MG-ADL≥6分，n=18）和低负担组（MG-ADL<6分，n=42）（表4）。

高负担组的血清Cys-C水平高于低负担组（p = 6.10E-02），两组均显著高于健康对照（高负担组 p = 4.47E-05；低负担组 p = 6.00E-03）（图3A）。

进一步分析发现，血清Cys-C水平与MG临床严重程度（MG-QMG和MG-ADL评分）均呈显著正相关（MG-QMG p = 3.90E-03；MG-ADL p = 2.40E-03），而与AChR抗体滴度无相关性（p = 6.50E-01）（图3B）。在接受治疗后，患者血清Cys-C将显著下降（p < 0.001）（图3C）。

机制探索：血清Cys-C可能参与MG患者Th2向Th1免疫应答转化

对25例gMG患者T淋巴细胞亚群的比例或计数进行分析发现，MG患者Th1细胞比例较HC明显升高（p = 1.37E-03），Th2细胞比例无显著变化，Th1/Th2比例显著升高（p = 1.48E-02）且与血清Cys-C水平呈显著正相关（p = 3.10E-02）（图4）。此外，MG患者血浆中炎症因子如IL-6、IL-8和IL-10均有升高趋势，可能介导了上述免疫转化过程（见图4C）。